肝X受体β在电针治疗慢性脑缺血炎性损伤中的作用研究

doi:10.3877/cma.j.issn.1674-6880.2022.02.006

目的

探讨肝X受体β（LXRβ）在电针治疗慢性脑缺血炎性损伤中的作用。

方法

将40只雄性大鼠采用随机数字表法分为假手术组、模型组、激动剂组和电针组，每组各10只。假手术组大鼠麻醉切开颈部皮肤后，仅分离双侧颈总动脉，不进行结扎。模型组、激动剂组和电针组大鼠均给予经典二血管闭塞（2-VO）制备慢性脑缺血大鼠模型，激动剂组大鼠造模成功后喂食LXRβ激动剂T0901317（1 mg/kg，每日1次，连续7 d），电针组大鼠造模成功后给予电针治疗，持续1周。于术后2周从各组中分别选取1只大鼠采用快速断头取脑法进行模型病理性评估。各组大鼠于术后第4周采用Morris水迷宫考察认知功能情况。水迷宫实验结束5 d后，采用苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠脑组织海马CA1区的病理形态变化，采用酶联免疫吸附测定检测海马CA1区白细胞介素1β（IL-1β）、IL-6及肿瘤坏死因子α（TNF-α）的表达水平，采用Western-blotting法检测海马CA1区LXRβ、核因子κB1（NF-κB1）P50及NF-κB1 P105蛋白表达。

结果

各组大鼠在定位航行实验中的平台距离与爬上平台所需时间（F = 2.960、2.945，P = 0.045、0.046），在空间探索实验中第一次到达平台时间与穿越平台的次数间比较（F = 7.627、3.512，P = 0.001、0.024），差异均有统计学意义。且与模型组相比，电针组及激动剂组大鼠平台距离均减小[（1 136 ± 857）、（760 ± 629）、（699 ± 702）cm]，爬上平台所需时间[（49 ± 41）、（36 ± 28）、（34 ± 33）s]及第一次到达平台时间[（38 ± 19）、（29 ± 25）、（24 ± 18）s]均缩短（P均<0.05），但在穿越平台的次数上仅电针组大鼠显著增多[（2.0 ± 1.4）vs.（3.9 ± 1.8），P<0.05]。HE染色提示模型组大鼠海马CA1区神经元胞核染色加深，排列松散，细胞层数减少；电针组与激动剂组大鼠的神经元细胞形态结构有明显改善，神经元数量增多，细胞层数显著增多。各组大鼠海马CA1区脑组织IL-1β（F = 18.350，P < 0.001）、IL-6（F = 4.235，P = 0.018）和TNF-α（F = 4.190，P = 0.019）水平的比较差异均有统计学意义。且与模型组相比，电针组和激动剂组大鼠IL-1β[（357 ± 38）、（278 ± 45）、（232 ± 54）ng/L]、IL-6[（287 ± 45）、（188 ± 54）、（213 ± 54）ng/L]和TNF-α[（383 ± 45）、（236 ± 54）、（251 ± 91）ng/L]表达水平均显著下降（P均<0.05）。Western-blotting显示，各组大鼠海马CA1区脑组织LXRβ及NF-κB1 P50蛋白的比较，差异均无统计学意义（F=0.661、0.315，P=0.586、0.815）。而各组间NF-κB1 P105蛋白表达的比较，差异有统计学意义（F=3.940，P=0.023），且与模型组相比，电针组及激动剂组的NF-κB P105蛋白表达显著减少[（4.0 ± 0.7）× 10^-2、（2.8 ± 1.0）× 10^-2、（2.7 ± 1.1）× 10^-2，P均<0.05]。

结论

LXRβ受体的激活在抑制慢性脑缺血过度炎症反应过程中发挥重要作用，电针能起到抑制慢性脑缺血炎性损伤的作用，但电针不具备上调LXRβ表达的作用。

关键词: 脑缺血, 炎性损伤, 肝X受体β, 电针

表1 各组大鼠水迷宫实验结果的比较（± s）

组别	只数	定位航行实验		空间探索实验
组别	只数	平台距离（cm）	爬上平台所需时间（s）	第一次到达平台时间（s）	穿越平台的次数（次）
假手术组	9	269 ± 159	23 ± 32	12 ± 6	3.9 ± 1.7
模型组	9	1 136 ± 857^a	49 ± 41^a	38 ± 19^a	2.0 ± 1.4^a
电针组	9	760 ± 629^b	36 ± 28^b	29 ± 25^b	3.9 ± 1.8^b
激动剂组	9	699 ± 702^b	34 ± 33^b	24 ± 18^b	2.2 ± 1.8
F值		2.960	2.945	7.627	3.512
P值		0.045	0.046	0.001	0.024

表1 各组大鼠水迷宫实验结果的比较（± s）

组别	只数	定位航行实验		空间探索实验
组别	只数	平台距离（cm）	爬上平台所需时间（s）	第一次到达平台时间（s）	穿越平台的次数（次）
假手术组	9	269 ± 159	23 ± 32	12 ± 6	3.9 ± 1.7
模型组	9	1 136 ± 857^a	49 ± 41^a	38 ± 19^a	2.0 ± 1.4^a
电针组	9	760 ± 629^b	36 ± 28^b	29 ± 25^b	3.9 ± 1.8^b
激动剂组	9	699 ± 702^b	34 ± 33^b	24 ± 18^b	2.2 ± 1.8
F值		2.960	2.945	7.627	3.512
P值		0.045	0.046	0.001	0.024

图1 各组大鼠海马CA1区神经元HE染色结果（HE染色　× 100）注：a图为假手术组，显示神经元胞核与胞质界限清晰，形态完整，排列整齐，细胞层数多；b图为模型组，显示神经元胞核染色加深，排列松散，细胞层数减少；c~d图分别为电针组与激动剂组，显示神经元细胞形态结构有明显改善，神经元数量增多，细胞层数显著增多

表2 各组大鼠脑组织海马CA1区IL-1β、IL-6和TNF-α水平的比较（ng/L，± s）

组别	只数	IL-1β	IL-6	TNF-α
假手术组	6	198 ± 27	207 ± 30	236 ± 117
模型组	6	357 ± 38^a	287 ± 45^a	383 ± 45^a
电针组	6	278 ± 45^b	188 ± 54^b	236 ± 54^b
激动剂组	6	232 ± 54^b	213 ± 54^b	251 ± 91^b
F值		18.350	4.235	4.190
P值		< 0.001	0.018	0.019

表2 各组大鼠脑组织海马CA1区IL-1β、IL-6和TNF-α水平的比较（ng/L，± s）

组别	只数	IL-1β	IL-6	TNF-α
假手术组	6	198 ± 27	207 ± 30	236 ± 117
模型组	6	357 ± 38^a	287 ± 45^a	383 ± 45^a
电针组	6	278 ± 45^b	188 ± 54^b	236 ± 54^b
激动剂组	6	232 ± 54^b	213 ± 54^b	251 ± 91^b
F值		18.350	4.235	4.190
P值		< 0.001	0.018	0.019

表3 各组大鼠脑组织海马CA1区LXRβ及NF-κB相关蛋白水平的比较（± s）

组别	只数	LXRβ（× 10^-2）	NF-κB1 P105（× 10^-2）	NF-κB1 P50（× 10^-2）
假手术组	6	5.5 ± 2.4	2.8 ± 1.2	3.2 ± 1.0
模型组	6	6.7 ± 2.2	4.0 ± 0.7^a	3.6 ± 1.0
电针组	6	5.8 ± 1.9	2.8 ± 1.0^b	3.1 ± 0.8
激动剂组	6	5.2 ± 1.3	2.7 ± 1.1^b	3.3 ± 1.1
F值		0.661	3.940	0.315
P值		0.586	0.023	0.815

表3 各组大鼠脑组织海马CA1区LXRβ及NF-κB相关蛋白水平的比较（± s）

组别	只数	LXRβ（× 10^-2）	NF-κB1 P105（× 10^-2）	NF-κB1 P50（× 10^-2）
假手术组	6	5.5 ± 2.4	2.8 ± 1.2	3.2 ± 1.0
模型组	6	6.7 ± 2.2	4.0 ± 0.7^a	3.6 ± 1.0
电针组	6	5.8 ± 1.9	2.8 ± 1.0^b	3.1 ± 0.8
激动剂组	6	5.2 ± 1.3	2.7 ± 1.1^b	3.3 ± 1.1
F值		0.661	3.940	0.315
P值		0.586	0.023	0.815

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Role of liver X receptor β in the treatment of chronic cerebral ischemic inflammatory injury by electroacupuncture

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